你知道熒光素鉀鹽適合做哪些實(shí)驗(yàn)么

　　熒光素鉀鹽和5-氟-熒光素，作為Luciferase的作用底物，常用于以下實(shí)驗(yàn)：

　　1. 報(bào)告基因分析

　　2. In vivo imaging (動物活體成像)

　　3. In vitro imaging (細(xì)胞體外分析)

　　4. ATP測定

　　5. 其它luciferase及其基因相關(guān)的分析和研究工作

　　2、熒光素鉀鹽應(yīng)用于活體成像的基本原理

　　細(xì)胞中D-熒光素酶參與的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)遵守酶促反應(yīng)的基本原理，在底物D-熒光素鉀過量的情況下，反應(yīng)產(chǎn)生的光子數(shù)(發(fā)光量)與細(xì)胞中的D-熒光素酶的量成正相關(guān)，從而可以推算出細(xì)胞的數(shù)量。

　　3、D-熒光素鉀鹽溶液的穩(wěn)定性

　　D-熒光素鉀鹽易溶于水和緩沖液，溶解度可高達(dá)25mg/mL。一般使用濃度為3-15 mg/mL。

　　溶液的pH值、溶液中的氧氣和保存時(shí)間對其保存過程中的穩(wěn)定性非常重要。當(dāng)溶液的pH<6.5(發(fā)生水解作用)或>7.5(發(fā)生消旋化作用，D型轉(zhuǎn)化為L型)的情況下，D-熒光素鉀鹽相對不穩(wěn)定。如果溶液中存在少量的氧氣，將加速D-熒光素鉀的降解速度。

　　熒光素鉀鹽配成溶液后，在的保存條件(-80°C，pH，無氧氣)下，存在固定的降解速度：0.2%/天，因此配成溶液保存的D-熒光素應(yīng)盡量在1年內(nèi)使用完。

　　有水存在的情況下，主要發(fā)生消旋化作用，即D-熒光素轉(zhuǎn)化成L-熒光素，有報(bào)道稱L-熒光素對熒光素酶催化的酶促反應(yīng)有抑制作用。

　　4、D-熒光素、D-熒光素鈉和D-熒光素鉀之間的區(qū)別

　　主要區(qū)別在于溶解和分散性能。D-熒光素鉀鹽在水和緩沖液中的溶解度高，且溶解速度較快，故在一般的生物學(xué)試驗(yàn)中常用D-熒光素鉀鹽。

　　5、熒光素鉀鹽的保存和運(yùn)輸條件

　　保存條件：≤-20°C，避光，保持干燥。(在不打開包裝的條件下，可保存兩年時(shí)間)。

　　運(yùn)輸條件：高純度的D-熒光素鉀鹽可在短時(shí)間內(nèi)常溫條件下保存，運(yùn)輸條件為常溫。

　　原裝(沒有打開包裝)熒光素的包裝瓶中充有氬氣，保證其穩(wěn)定性，打開包裝后，請嚴(yán)格按照保存條件保存。

　　D-熒光素鉀鹽具有易溶于水的特性，其暴露于空氣中，易吸潮。在稱量過程中，請考慮其易吸潮的特性，先進(jìn)行溫度平衡，再快速稱取